高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動時，經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。

儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的“吸附-解吸”的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣本濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式輸出檢測結果。

高效液相色譜儀原理：

根據分離機制的不同，HPLC原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法及分子排阻色譜法。

1. 液固吸附色譜法

液固吸附色譜法中，固定相為固體吸附劑，根據各組分吸附能力差異而使組分得以分離。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，大多數用于非離子型化合物。吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。對流動相的要求為：

1) 選用的溶劑應當與固定相互不相溶，并能保持色譜柱的穩定性。

2) 選用的溶劑應有高純度，以防所含微量雜質在柱中積累，引起柱性能的改變。

3) 選用的溶劑性能應與所使用的檢測器相匹配，如果使用紫外吸收檢測器，就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑；若使用示差折光檢測器，就不能用梯度洗脫。

4) 選用的溶劑應對樣品有足夠的溶解能力，以提高測定的靈敏度。

5) 選用的溶劑應具有低的黏度和適當低的沸點。

6) 應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑，以保證工作人員的安全。

液固色譜法是以表面吸附性能力為依據的，所以它常用于分離極性不同的化合物，也能分離那些具有相同極性基團，但數量不同的樣品。